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培養(yǎng)基配制好后需要立即滅菌應(yīng)用案例

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培養(yǎng)基配制好后需要立即滅菌

培養(yǎng)基,是指供給微生物、植物或動(dòng)物(或組織)生長(zhǎng)繁殖的,由不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。

一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類(lèi)物質(zhì)。培養(yǎng)基既是提

供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境。

培養(yǎng)基種類(lèi)很多,根據(jù)配制原料的來(lái)源可分為自然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基;根據(jù)物理狀態(tài)可

分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基;根據(jù)培養(yǎng)功能可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)

基、鑒別培養(yǎng)基等;根據(jù)使用范圍可分為細(xì)菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基、真菌培養(yǎng)基等。

培養(yǎng)基配成后一般需測(cè)試并調(diào)節(jié) pH,還須進(jìn)行滅菌,通常有高溫滅菌和過(guò)濾滅菌。培養(yǎng)基由于富含營(yíng)養(yǎng)

物質(zhì),易被污染或變質(zhì)。配好后不宜久置,zui好現(xiàn)配現(xiàn)用。

培養(yǎng)基制備過(guò)程

1.配料

配方換算→在容器中加入少量水(蒸餾水,自然水)→按照配方稱取各種藥品(依次加入)→加足所需水

量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。

2.溶解

淀粉溶解:少量冷水調(diào)成糊狀。加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度

95-97℃ ,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。

3.調(diào) PH

 1N 的鹽酸或 1N  NaOH 把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。

4.過(guò)濾

濾紙或棉花進(jìn)行過(guò)濾。(有時(shí)可以省去) [4]

5.分裝

一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。

(1)三角瓶

若作靜置培養(yǎng),則 100ml 培養(yǎng)基/250ml 的三角瓶,zui多不能超過(guò) 150ml 培養(yǎng)基/250ml 

三角瓶,否則滅菌時(shí)培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養(yǎng),則 15-20ml 培養(yǎng)基/250ml 

三角瓶,保證通氣良好。

(2)試管分裝

液體培養(yǎng)基一般裝 4-5ml,約試管的 1/4 高度;

固體斜面培養(yǎng)基一般裝 3-4ml,約試管的 1/5 高度。

6.包扎

分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時(shí)水份進(jìn)入把棉塞弄濕。

7.滅菌

按配方上要求的溫度、壓力進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營(yíng)養(yǎng)成分會(huì)被破壞,培養(yǎng)

基中的糖、氨基酸會(huì)使培養(yǎng)基的顏色變深。

8.擺斜面

滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個(gè)斜面,約占試管長(zhǎng)度的 1/2。

  1. 貯存

 

 

 

 

 

培養(yǎng)基在 30℃下放置一天,無(wú)污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于 2-8℃冰箱中備用

培養(yǎng)基配制好后為什么必須立即滅菌?

大家都知道,培養(yǎng)基是供微生物生長(zhǎng)、繁殖、代謝的混合養(yǎng)料。由于微生物具有不同的營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型,對(duì)營(yíng)養(yǎng)

物質(zhì)的要求也各不相同,加之實(shí)驗(yàn)和研究的目的不同,所以培養(yǎng)基的種類(lèi)很多,使用的原料也各有差異。

為了達(dá)到實(shí)驗(yàn)和研究的目的,要按照培養(yǎng)基的配方進(jìn)行配制。而任何一種培養(yǎng)基一經(jīng)制成就應(yīng)及時(shí)*滅

菌,以備純 培養(yǎng)用。一般培養(yǎng)基的滅菌采用高壓蒸汽滅菌

發(fā)酵過(guò)程中,培養(yǎng)基滅菌主要有以下幾個(gè)原因:如不滅菌,會(huì)使生物反應(yīng)的基質(zhì)或產(chǎn)物,因雜菌的消耗而

損失,造成生產(chǎn)能力的下降;雜菌也會(huì)產(chǎn)生代謝產(chǎn)物,這 就使產(chǎn)物的提取更加困難,造成得率降低,產(chǎn)品

質(zhì)量下降;雜菌大量繁殖后,會(huì)改變反應(yīng)液的 pH 值,使反應(yīng)異常;有些雜菌會(huì)分解產(chǎn)物,使生產(chǎn)失敗;如果發(fā)

生噬 菌體污染,生產(chǎn)菌細(xì)胞將被裂解,使生產(chǎn)失敗。

培養(yǎng)基滅菌是殺滅培養(yǎng)基中本身的原著菌或在空氣中附著的雜菌,更好的讓目標(biāo)菌生長(zhǎng)(減少雜菌消耗培養(yǎng)

基中的營(yíng)養(yǎng),而且有些雜菌會(huì)抑制你目標(biāo)菌的生長(zhǎng))。一般人工培養(yǎng)菌基本上是盡可能讓其生長(zhǎng)快速或者產(chǎn)

生代謝產(chǎn)物,因此就讓其在zui適培養(yǎng)基上生長(zhǎng),以減少培養(yǎng)時(shí)間與提高經(jīng)濟(jì)效益。

采用哪種高壓蒸汽滅菌,推薦 ALP 高壓滅菌器

*、滅菌效果強(qiáng)、安全性高、帶真空干燥功能、排氣功能、使用壽命長(zhǎng)(曾有客戶使用超過(guò) 15 年),

是具備《進(jìn)口壓力容器生產(chǎn)許可證》、《進(jìn)出口鍋爐壓力容器安全性能檢驗(yàn)證書(shū)》、《計(jì)量證書(shū)》等證書(shū)

齊全的滅菌器。

ALP 高壓蒸汽滅菌器開(kāi)關(guān)輕松簡(jiǎn)便,電子鎖僅在通電時(shí)才可開(kāi)啟,避免因斷電或關(guān)機(jī)時(shí)意外泄漏未滅菌物

質(zhì)。高壓蒸汽滅菌器可清晰顯示所處的狀態(tài),如溫度、壓力、程序及操作過(guò)程中的其它相關(guān)信息。高壓蒸

汽滅菌器脈沖空氣凈化反復(fù)進(jìn)行,直至壓力高于對(duì)應(yīng)溫度而產(chǎn)生過(guò)飽和蒸汽壓保證滅菌效果。高壓蒸汽滅

菌器可根據(jù)被滅菌物質(zhì)的情況調(diào)整蒸汽排放情況,高壓蒸汽滅菌器具備快速冷卻功能可使滅菌后快速降溫

 80℃以下的安全溫度。ALP 高壓蒸汽滅菌器通過(guò)真空泵及經(jīng) 0.2um 的濾膜過(guò)濾后的熱空氣快速干燥樣

品,使其快速可用。高壓蒸汽滅菌器標(biāo)配物溫探頭安裝孔,選配物溫探頭,方便進(jìn)行內(nèi)部滅菌效果的驗(yàn)證。

高壓蒸汽滅菌器三重脈沖,預(yù)真空設(shè)備配置強(qiáng)大的真空泵強(qiáng)行排空腔內(nèi)留存的空氣,使飽和蒸汽良好的滲

透入滅菌物品中,從而確保充分有效的滅菌效果。

當(dāng)然,除了以上證書(shū)、功能方面的因素,選擇合適的供應(yīng)商也是非常重要的。一般zui好找產(chǎn)品的一級(jí)代理,

可以保證有zui好的價(jià)格、供貨的快捷及的服務(wù)。以*的日本 ALP 高壓滅菌器為例,該產(chǎn)品由東

南科儀公司總代理。

 

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