培養(yǎng)基，是指供給微生物、植物或動物（或組織）生長繁殖的，由不同營養(yǎng)物質組合配制而成的營養(yǎng)基質。 一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽（包括微量元素）、維生素和水等幾大類物質。培養(yǎng)基既是提 供細胞營養(yǎng)和促使細胞增殖的基礎物質，也是細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。 培養(yǎng)基種類很多，根據(jù)配制原料的來源可分為自然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基；根據(jù)物理狀態(tài)可 分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基；根據(jù)培養(yǎng)功能可分為基礎培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、加富培養(yǎng) 基、鑒別培養(yǎng)基等；根據(jù)使用范圍可分為細菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基、真菌培養(yǎng)基等。 培養(yǎng)基配成后一般需測試并調節(jié) pH，還須進行滅菌，通常有高溫滅菌和過濾滅菌。培養(yǎng)基由于富含營養(yǎng) 物質，易被污染或變質。配好后不宜久置，zui好現(xiàn)配現(xiàn)用。 培養(yǎng)基制備過程 1.配料 配方換算→在容器中加入少量水（蒸餾水，自然水）→按照配方稱取各種藥品（依次加入）→加足所需水 量（一藥一勺，取藥后立即蓋上瓶蓋）。 2.溶解 淀粉溶解：少量冷水調成糊狀。加熱溶解，特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基，一定要煮沸，瓊脂的熔解溫度 95-97℃ ，且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。 3.調 PH 用 1N 的鹽酸或 1N 的 NaOH 把培養(yǎng)基調節(jié)到所要求的值。 4.過濾 濾紙或棉花進行過濾。（有時可以省去） [4] 5.分裝 一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。 (1)三角瓶 若作靜置培養(yǎng)，則 100ml 培養(yǎng)基/250ml 的三角瓶，zui多不能超過 150ml 培養(yǎng)基/250ml 的 三角瓶，否則滅菌時培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞，造成染菌；若作搖瓶培養(yǎng)，則 15-20ml 培養(yǎng)基/250ml 的 三角瓶，保證通氣良好。 (2)試管分裝 液體培養(yǎng)基一般裝 4-5ml，約試管的 1/4 高度； 固體斜面培養(yǎng)基一般裝 3-4ml，約試管的 1/5 高度。 6.包扎 分裝好后，塞上棉塞，在用牛皮紙將棉塞包裹好，防止滅菌時水份進入把棉塞弄濕。 7.滅菌 按配方上要求的溫度、壓力進行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高，營養(yǎng)成分會被破壞，培養(yǎng) 基中的糖、氨基酸會使培養(yǎng)基的顏色變深。 8.擺斜面 滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放，使其凝固成為一個斜面，約占試管長度的 1/2。 9.貯存 培養(yǎng)基在 30℃下放置一天，無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于 2-8℃冰箱中備用 培養(yǎng)基配制好后為什么必須立即滅菌？ 大家都知道，培養(yǎng)基是供微生物生長、繁殖、代謝的混合養(yǎng)料。由于微生物具有不同的營養(yǎng)類型，對營養(yǎng) 物質的要求也各不相同，加之實驗和研究的目的不同，所以培養(yǎng)基的種類很多，使用的原料也各有差異。 為了達到實驗和研究的目的，要按照培養(yǎng)基的配方進行配制。而任何一種培養(yǎng)基一經(jīng)制成就應及時*滅 菌，以備純 培養(yǎng)用。一般培養(yǎng)基的滅菌采用高壓蒸汽滅菌。 發(fā)酵過程中，培養(yǎng)基滅菌主要有以下幾個原因：如不滅菌，會使生物反應的基質或產(chǎn)物，因雜菌的消耗而 損失，造成生產(chǎn)能力的下降;雜菌也會產(chǎn)生代謝產(chǎn)物，這 就使產(chǎn)物的提取更加困難，造成得率降低，產(chǎn)品 質量下降;雜菌大量繁殖后，會改變反應液的 pH 值，使反應異常;有些雜菌會分解產(chǎn)物，使生產(chǎn)失敗;如果發(fā) 生噬 菌體污染，生產(chǎn)菌細胞將被裂解，使生產(chǎn)失敗。 培養(yǎng)基滅菌是殺滅培養(yǎng)基中本身的原著菌或在空氣中附著的雜菌,更好的讓目標菌生長(減少雜菌消耗培養(yǎng) 基中的營養(yǎng)，而且有些雜菌會抑制你目標菌的生長)。一般人工培養(yǎng)菌基本上是盡可能讓其生長快速或者產(chǎn) 生代謝產(chǎn)物,因此就讓其在zui適培養(yǎng)基上生長,以減少培養(yǎng)時間與提高經(jīng)濟效益。 采用哪種高壓蒸汽滅菌，推薦 ALP 高壓滅菌器 *、滅菌效果強、安全性高、帶真空干燥功能、排氣功能、使用壽命長（曾有客戶使用超過 15 年）， 是具備《進口壓力容器生產(chǎn)許可證》、《進出口鍋爐壓力容器安全性能檢驗證書》、《計量證書》等證書 齊全的滅菌器。 ALP 高壓蒸汽滅菌器開關輕松簡便，電子鎖僅在通電時才可開啟，避免因斷電或關機時意外泄漏未滅菌物 質。高壓蒸汽滅菌器可清晰顯示所處的狀態(tài)，如溫度、壓力、程序及操作過程中的其它相關信息。高壓蒸 汽滅菌器脈沖空氣凈化反復進行，直至壓力高于對應溫度而產(chǎn)生過飽和蒸汽壓保證滅菌效果。高壓蒸汽滅 菌器可根據(jù)被滅菌物質的情況調整蒸汽排放情況，高壓蒸汽滅菌器具備快速冷卻功能可使滅菌后快速降溫 到 80℃以下的安全溫度。ALP 高壓蒸汽滅菌器通過真空泵及經(jīng) 0.2um 的濾膜過濾后的熱空氣快速干燥樣 品，使其快速可用。高壓蒸汽滅菌器標配物溫探頭安裝孔，選配物溫探頭，方便進行內部滅菌效果的驗證。 高壓蒸汽滅菌器三重脈沖，預真空設備配置強大的真空泵強行排空腔內留存的空氣，使飽和蒸汽良好的滲 透入滅菌物品中，從而確保充分有效的滅菌效果。 當然，除了以上證書、功能方面的因素，選擇合適的供應商也是fei常重要的。一般zui好找產(chǎn)品的一級代理， 可以保證有zui好的價格、供貨的快捷及的服務。以*的日本 ALP 高壓滅菌器為例，該產(chǎn)品由東 南科儀公司zong代理。 |
